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凋亡流式

凋亡流式是一 種 用於 檢 測 細胞凋亡的技 術,主要通 過 結合Annexin V-FITC和碘化丙啶(PI) 兩 種染料 來 實 現。Annexin V-FITC是一 種可以 與磷脂 醯 絲氨酸(PS)高 親和力 結合的 螢光素 標 記蛋白,它 無法穿透完整的 細胞膜。而碘化丙啶(PI)是一 種核酸染料,它不能透 過完整的 細胞膜,但可以透 過 細胞膜的破 損部分, 從而能 夠 將 細胞核染 紅。

在凋亡流式分析中,首先需要 將 細胞 與Annexin V-FITC和PI混合,然 後通 過流式 細胞 儀 進行 檢 測。在 檢 測 過程中,可以通 過 設定不同的 門控 來 區分不同 階段的 細胞凋亡。例如,早期凋亡 細胞和晚期凋亡 細胞的 區分可以通 過Annexin V-FITC和PI的 結合 與否 來 實 現。此外, 還需要注意 樣品的 製備和上 樣 時 間,以避免 細胞 狀 態的 變化影 響 檢 測 結果。

在流式 細胞 儀上,可以通 過散 點 圖和波形 圖 來展示和分析 數 據。散 點 圖通常 用於展示 細胞群在 兩個 參 數(如FITC-A和SSC-A)上的分 布,而波形 圖 則 用於展示 細胞群在另 一個 參 數(如FITC-A或PE-A)上的分 布。在 數 據分析 時, 還需要 進行 補 償 調 節,以 確保 數 據的 準確性和可靠性。