尺寸排阻法，也稱為尺寸排阻色譜法或凝膠色譜法，是一種根據分子尺寸差異進行分離的液相色譜技術。其分離原理主要依賴於凝膠作為固定相，凝膠是一種分子篩，具有不同大小的孔穴或立體網狀結構。這些孔穴的大小與被分離組分的大小相匹配，使得不同大小的組分分子能夠滲入凝膠的不同深度。較大尺寸的組分分子只能滲入凝膠的大孔內，而較小尺寸的組分分子可以滲入凝膠的小孔和大孔，因此在色譜柱中的停留時間較長，最後流出。這樣，各組分按照分子大小得到分離。
在尺寸排阻色譜法中，常用的固定相有無機凝膠和有機凝膠兩種。無機凝膠如多孔矽膠或多孔玻璃珠，具有較好的化學惰性、穩定性和機械強度，適用於高溫環境，但裝柱時易碎。有機凝膠如苯乙烯二乙烯苯交聯共聚物凝膠，適用於有機溶劑作流動相，但存在一定程度的膨脹。新型凝膠色譜填料具有細粒度、高機械強度、快速分離和高效的特點，廣泛套用於生物大分子的分離。
流動相的選擇應考慮與樣品的溶解性和凝膠的相似性，低黏度且與樣品折光率差異大，以潤濕凝膠並防止吸附作用。常用的流動相包括四氫呋喃、甲苯、N,N』-二甲基甲酸胺和三氯甲烷等。
尺寸排阻色譜法的分離效果不僅取決於溶質分子與固定相之間的相互作用，還受到色譜柱內其他次級作用力的影響。因此，在選擇色譜柱時，需要考慮目標物的分子量和合適孔徑的色譜柱。