使用比色卡的方法取決於比色卡的具體類型和使用場景。以下是幾種不同情況下使用比色卡的步驟：
對於評估新生兒皮膚黃疸的比色卡。應在自然光線良好的室內使用。持比色卡貼近新生兒的前額、面頰及胸骨處的皮膚。用一手指按壓待測皮膚2秒後迅速離去，然後用比色卡與暴露的黃色皮膚進行比色。
對於土壤顏色評估的比色卡。應在等量光線下進行，最好將樣品和色片放在窗戶旁邊，使光線自然地從側面45度角照射在樣品及色片上。比較土樣經手指粉碎壓平後的平坦表面顏色，或者將樣品放在土壤顏色測定盤上比色。對於溼土和乾土兩種狀態的顏色都要進行評估。
對於評估蛋黃顏色和密度的比色卡。包含16種不同顏色的色板和不同的指數。只需將比色卡打開後與蛋黃進行對比，選擇與蛋黃顏色相近的色板顏色數值並記錄下來即可。
對於一般色卡的查詢和使用。可以通過色號快速查詢色卡的顏色。在標準光源對色燈箱中進行檢測，或者在均勻的自然光下拿產品和色卡進行顏色比較。目視評定的角度最好是45度。避免在普通的燈光下進行比色，因爲光源的影響可能導致顏色評估不準確。
每種方法的具體步驟可能略有不同，但基本原理是在標準化的光照條件下，將樣品顏色與已知的標準顏色進行對比，以評估樣品的顏色特性。