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cck8方法

CCK-8(Cell Counting Kit-8)是一種廣泛套用於細胞增殖和毒性分析的試劑盒。以下是CCK-8方法的基本步驟:

製備細胞懸液。選取生長狀態良好的對數生長期細胞,製作成細胞懸液,並計數。

接種細胞。在96孔板中以100 μL/孔的體積接種細胞懸液,然後將其置於37℃、5% CO2的培養箱中預培養12-24小時,使細胞達到指數期。

加入待測藥物。吸出培養基,向培養板加入不同濃度的待測藥物進行干預。實驗組加入含不同濃度藥物的培養基,空白組加入不含藥物的培養基。

加入CCK-8試劑。將培養板在培養箱中繼續培養6、12、24或48小時,具體時間根據細胞周期決定。每孔加入10 μL CCK-8試劑。

檢測OD值。將培養板置於培養箱內繼續培養1-4小時,使用酶標儀檢測450 nm波長的吸光度(OD值)。

OD值可以通過以下公式計算以評估細胞活力或抑制率:

細胞活力(%)= [(As - Ab) / (Ac - Ab)] × 100%

細胞抑制率(%)= [(Ac - As) / (Ac - Ab)] × 100%

其中As代表實驗組(含細胞、培養基、CCK-8溶液和藥物溶液)的吸光度,Ac代表對照組(含細胞、培養基、CCK-8溶液,不含藥物)的吸光度,Ab代表空白組(含培養基、CCK-8溶液,不含細胞、藥物)的吸光度。