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ctab配方

CTAB配方通常用於提取核酸,尤其是RNA,它是一種有效的去污劑。一個典型的CTAB配方包含以下成分:

CTAB(十六烷基三甲基溴化銨)。4g

NaCl。16.34g

1M Tris-HCl。20ml,pH8.0

0.5M EDTA。8ml

PVP-360(聚乙烯吡咯烷酮)。2g

該配方可以定容至200ml,並在pH為8的情況下進行滅菌。在使用前,加入0.2-1%的2-巰基乙醇(400ul)以及氯仿-異戊醇(24:1的比例),氯仿96ml和異戊醇4ml混合均勻即可。

此外,還有一種配方包含2% CTAB(W/V)、2% 聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V)、100 mM Tris-HCl(pH8.0,用DEPC處理的水配置)、25mM EDTA和0.5g/L亞精胺Spermidine,以及2.0M NaCl和2%巰基乙醇(V/V,使用前加入)。

注意,由於CTAB具有強烈的去污和沉澱蛋白質的能力,通常需要在高溫下進行滅菌,這可能導致某些成分(如Tris-HCl和EDTA)發生反應。因此,在配製RNA提取緩衝液時,建議使用DEPC處理的水來配置這些成分,以避免與Tris-HCl的反應。