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dpph法

DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)清除能力檢測方法是一種評估抗氧化性能的常用方法,主要用於測定天然產物、藥物和食品中的抗氧化能力。其檢測原理是基於DPPH自由基的穩定性及其在特定波長下的強吸收特性,DPPH是一種穩定的氮中心自由基,在517nm波長處有最大吸收,其醇溶液呈紫色。當有抗氧化劑存在時,DPPH自由基的單電子可以被配對,導致溶液的吸光度降低,從而反映出抗氧化劑的清除能力。

具體操作步驟如下:

準備DPPH溶液和待測樣品。將DPPH溶液稀釋至適當濃度(通常為0.1mM),待測樣品用乙醇溶解並調整至適當濃度。

取一定量的DPPH溶液和待測樣品混合均勻,反應至少30分鐘。

使用紫外可見分光光度計測量混合物的吸光度,以確定DPPH溶液的吸收情況。通常在517nm波長處測量吸光度。

計算樣品的DPPH清除能力。通過比較混合物與原始DPPH溶液的吸光度來進行計算。

此外,DPPH清除法的優點包括成本低、易於操作、重現性好,適用於多種樣品。但也存在一些局限性,如反應可能在某種程度上是可逆的,因此測得的抗氧化能力可能低於實際水平。此外,DPPH法主要檢測單一自由基的清除能力,可能不足以全面評估樣品的抗氧化性能。因此,在實驗中結合其他抗氧化性能評估方法可以獲得更加全面和準確的結論。