HPLC（High Performance Liquid Chromatography）分析方法主要包括以下幾個步驟：
確定目標化合物性質：首先需要明白待分離雜質的一些性質，如分子量、結構式（主要看有哪種基團），以及該種物質在哪種有機溶劑中易容。結構式對於分子極性大小的預測以及判定該物質是否容易水解有非常重要的作用。
確定正反相洗脫方式：確定洗脫方式後，反向的話個人推薦先用60%的乙腈或者是甲醇，先去看一下你需要分離的幾種物質能否被分開。在能分開的前提下，再看一下最後一個峰的出峰時間，如果時間比較長的話，再根據前幾個峰的分離度確定是否需要加大或者縮小有機相的比例。
化學鍵合相色譜法：以化學鍵合相（通過化學反應將有機基團鍵合在載體表面）為固定相。正相鍵合相色譜法主要用於分離溶於有機溶劑的極性至中等極性的分子型化合物。反向鍵合相色譜法主要用於分離非極性或弱極性的物質。
以上步驟可以幫助用戶更好地理解和運用HPLC分析方法。