高效液相色譜儀(HPLC)的工作原理主要基於樣品在流動相和固定相之間的相對運動和相互作用。具體來說，HPLC系統主要包括儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄儀等部分。以下是其操作和原理的詳細介紹：
儲液器中的流動相（通常是溶劑或混合溶劑）被高壓泵送入系統。流動相可以是水、甲醇、乙腈等。
通過進樣器，樣品溶液被引入流動相中，隨後被流動相攜帶至色譜柱。
色譜柱是HPLC系統的核心部分，由固定相（存在於色譜柱中的多孔顆粒材料）和流動相組成。固定相可以是矽膠、氧化鋁等吸附劑，或者通過化學鍵合於擔體表面的特定液態物質。
樣品中的各組分在流動相和固定相之間發生吸附、分配、離子吸引等作用，由於各組分在兩相中的相互作用不同，它們在固定相中的滯留時間也不同，從而實現了樣品的分離。
分離後的組分依次從色譜柱流出，並通過檢測器。檢測器（如紫外檢測器、螢光檢測器）將組分濃度轉換成電信號，然後傳送到記錄儀，最終以圖譜形式輸出數據。
HPLC的特點包括高壓操作、高速分析、高分離度、高靈敏度等，它廣泛套用於生命科學、食品科學、藥物研究以及環境研究中。