MP3的主要功能包括：
音頻檔案播放。MP3能夠播放存儲在其中的音頻檔案，如MP3格式的音樂。
音樂檔案壓縮。MP3利用MPEG Audio Layer 3技術，能夠將音樂檔案壓縮至原來的一百分之一甚至十二分之一，同時在保持較高的音質。
多種附加功能。一些MP3播放器具備FM調頻、錄音、移動存儲等功能，甚至包括A-B復讀、跟讀、對比復讀等複雜功能。
顯示歌詞和歌曲名。高品質的MP3播放器能夠支持多國語言歌曲名的顯示，提供更好的用戶體驗。
此外，車載MP3（一種特殊的MP3播放器）主要用於在車輛中播放音樂，它可以通過USB接口或插入存儲卡來播放歌曲。車載MP3播放器通常具有簡單的操作界面，並且可以與車輛的音響系統連線，提供方便的音樂播放體驗。