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tunel原理

TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)技術是一種用於檢測細胞凋亡的分子生物學方法。

其基本原理是在細胞發生凋亡時,染色體DNA會發生雙鏈或單鏈斷裂,從而在DNA的3'端產生大量的粘性3'-OH末端。在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下,這些3'-OH末端可以加上標記有螢光素(如FITC)的dUTP(脫氧尿苷三磷酸),從而使得這些斷裂的DNA末端帶有螢光標記。

由於正常的或正在增殖的細胞幾乎沒有DNA的斷裂,因此它們很少被染色。這種方法可以對完整的單個凋亡細胞核或凋亡小體進行原位染色,準確地反映細胞凋亡的典型生物化學和形態特徵。TUNEL技術適用於石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培養的細胞和從組織中分離的細胞的細胞形態測定,並能檢測出極少量的凋亡細胞,因此在細胞凋亡的研究中被廣泛採用。