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放免法

放射免疫分析(Radioimmunoassay,簡稱RIA)是一種利用放射性核素標記抗原或抗體,然後與未標記的抗原或抗體結合形成複合物的原理來進行定量分析的方法。它主要包括兩種方法:

競爭性RIA(也稱為傳統RIA):

標記物:標記的是抗原。

原理:在反應中,未知抗原與標記抗原競爭與有限數量的抗體結合。如果未知抗原的量較多,那麼與抗體結合的標記抗原就較少,反之亦然。這種關係表現為負相關。

套用:臨床上常用於檢測甲胎蛋白AFP)、癌胚抗原(CEA)等。

反應方式:包括平衡法順序加樣法急診檢測法

分離方法:常用的分離劑有聚乙二醇PEG)和第二抗體。PEG在濃度達到7-9%時能使抗原-抗體複合物沉澱,而第二抗體則通過特異性結合形成大分子免疫複合物來沉澱。

非競爭性RIA(也稱為免疫放射分析,IRMA):

標記物:標記的是抗體。

原理:在反應中,標記的抗體與未標記的抗原結合,形成抗原-抗體複合物,然後通過檢測複合物中的放射性來確定抗原的量。

分類:根據反應原理分為單位點IRMA和多點IRMA。

RIA的優點包括高靈敏度、寬動態範圍和良好的特異性。然而,它也存在一些缺點,如操作複雜、需要特殊設備、放射性污染問題等。隨著技術的發展,RIA已經被更靈敏、更安全的檢測技術如酶聯免疫吸附試驗(ELISA)和化學發光免疫分析(CLIA)所部分替代。