斐林原理通常指的是斐林試劑法,這是一種用於測定蛋白質含量的方法。該方法結合了雙縮脲試劑和酚試劑與蛋白質的反應。具體步驟如下:
在鹼性條件下,蛋白質與銅試劑作用生成蛋白質-銅絡合物。
該絡合物隨後將磷鉬酸、磷鎢酸試劑還原,生成磷鑰藍和磷鎢藍的深監色混合物。
顏色的深淺與蛋白質含量成正相關,因此可以通過比色法來測定蛋白質的含量。
斐林試劑本身是二價銅離子的酒石酸鉀鈉配合物,它可以被脂肪醛或還原性糖還原為氧化亞銅。斐林反應則是利用還原性糖類(如葡萄糖、果糖等)與斐林試劑反應產生的氧化還原反應,其中還原性糖類被氧化,銅離子被還原成沉澱物。反應的結果是溶液顏色從藍色變為紅棕色,並產生沉澱物,這使得斐林反應成為檢測還原性糖類的重要工具。