蜘蛛分辨公母的方法主要包括以下幾點：
體型和體型差異。雌性蜘蛛通常略大於雄性蜘蛛，某些品種的體型差異可能更為顯著。
顏色和花紋。在顏色方面，多數品種的雄性蜘蛛顏色較鮮艷並有光澤，而雌性蜘蛛則相對暗淡。在花紋方面，雌性蜘蛛的花紋通常為單一的白色，而雄性蜘蛛的花紋在白色基礎上還可能有黑色的花紋。
腹部特徵。觀察蜘蛛腹部的書肺區域，前面一對書肺的中間有一條略為下陷的橫紋，稱為胃外溝。成熟雌蛛的生殖口特化成較硬的構造，而雄蛛及未成熟的雌蛛生殖口的構造不明顯。此外，成年的雄性蜘蛛還有精拳，而雌性蜘蛛卻沒有。
觸肢和步足。雄性蜘蛛的觸肢末端有一個精栓，且第一對步腳的脛節上會有一根小凸起物，雌蛛則沒有這兩個構造。
觀察蜘蛛脫殼後的特徵。在蜘蛛蛻皮後，觀察其內面特徵。雌性蜘蛛在4個白點中間若有一個小片則為雌性；若很光滑，只有一條不明顯細線則為雄性。這種方法適用於不同大小的蜘蛛。
通過以上特徵，可以較為準確地判斷蜘蛛的性別。