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高效液相的使用方法

高效液相色譜(HPLC)的使用方法主要包括以下幾個步驟:

樣品處理。準備樣品,確保樣品濃度為1mg/mL,樣品體積為1mL。使用2mL玻璃進樣小瓶裝載樣品,並確保進樣體積為5uL。

前期檢查工作。檢查儲液瓶中的液體量是否充足,並確認無沉澱。同時,檢查廢液瓶是否有足夠空間。還需要進行系統清洗,包括使用特定比例的流動相進行清洗。

儀器設定。先開啟電腦再開啟色譜儀,進行機器自檢。根據需要調整流動相比例並設定流速,確保出液口有溶劑流出後再開啟檢測器。設定檢測器參數,如DAD檢測器可掃描樣品的範圍波長,並查看樣品的紫外特徵吸收。

流動相準備。配製相應的流動相,並使用0.22mm微孔濾膜進行過濾,以確保流動相的純淨性。

開機平衡系統。開機後進行自檢,脫氣處理,設定柱溫,並進行柱塞桿和注射針的清洗。

運行樣品。保存儀器設定後,開始運行樣品。輸入樣品的相關信息,並根據儀器方法設定時間。

這些步驟確保了HPLC的正確和高效運行。在進行這些操作時,務必注意安全和準確性,特別是在處理樣品和調整儀器設定時。