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alkaline phosphatase作用

催化磷酸基團的去除

鹼性磷酸酶(Alkaline phosphatase,簡稱ALP)是一種水解酶,主要作用是催化磷酸基團的去除。在分子克隆實驗中,鹼性磷酸酶可以將DNARNA的5』端磷酸基團去除,從而阻止載體的自連作用。這是因為載體在經酶切後會在切點端保留一個磷酸基團,而經鹼性磷酸酶去磷酸化後,由於5』端無磷酸基團,因此不能與自身3』端連線。這樣,連線反應中載體本身優先發生的連線反應被阻止,提高了目的片段的插入率。

此外,鹼性磷酸酶還可以用於製備用於5』端標記的DNA模板,以及進行蛋白質的脫磷酸作用。它能夠降解幾乎所有磷酸單酯,但不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。

在生物體內,鹼性磷酸酶是成骨細胞的一種外酶,其表達活性是成骨細胞分化的一個明顯特徵。鹼性磷酸酶的活性失調與心血管疾病、糖尿病和癌症等疾病密切相關,是一種重要的生物標誌物。因此,鹼性磷酸酶的超靈敏檢測對臨床診斷和生物醫學研究具有重要意義。

鹼性磷酸酶標記親和素是一種生物分子,由鹼性磷酸酶和親和素結合而成。這種分子具有特別的結構和性質,使其在生物實驗和醫學中具有廣泛的套用。當鹼性磷酸酶標記親和素與目標分子結合時,可以利用底物磷酸化水解反應釋放出的螢光信號來檢測目標分子,這種檢測方法具有高靈敏度和高特異性的特點。