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crispr原理

CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)是一種原核生物基因組內的重複序列,是細菌和古菌在進化過程中為了抵抗病毒入侵而發展出的免疫系統。這一系統主要由兩部分組成:CRISPR陣列和CRISPR相關蛋白(Cas)。CRISPR陣列通常包含一個前導區、多個重複序列區和多個間隔區。這些間隔區是細菌捕獲的外源DNA序列,如病毒基因組的一部分,前導區富含AT,作為啟動子序列。重複序列區具有迴文結構,能形成發卡狀二級結構,而間隔區則分隔這些重複序列。

CRISPR/Cas系統的工作機制包括三個主要階段:適應階段、表達階段和干擾階段。在適應階段,系統將入侵的外源DNA(如病毒基因組)整合到CRISPR陣列中作為新的間隔序列;表達階段涉及CRISPR陣列的轉錄和加工成成熟的CRISPR RNA(crRNA);干擾階段則是通過crRNA與Cas蛋白形成複合體,特異性靶向並切割入侵的核酸,從而實現免疫防禦功能。

此外,CRISPR技術也被廣泛套用於基因編輯基因表達調控等領域。通過設計特定的guide RNA(sgRNA),可以引導Cas9蛋白對DNA進行定點切割,進而促進DNA修復過程中的突變或精確編輯。這種方法已經在科學研究和潛在的治療套用中展示了巨大的潛力。