ELISA（酶聯免疫吸附試驗）是一種廣泛使用的免疫分析技術，主要用於檢測生物樣品中的特定分析物，如細胞因子和抗體。ELISA的基本原理包括三個步驟：固相免疫吸附、抗原或抗體的特異性檢測以及酶反應。
固相免疫吸附：首先，將抗體或抗原固定到固相載體（如微孔板）上，形成固相抗體或抗原。這一步保持了免疫反應的活性。
抗原或抗體的特異性檢測：在實驗過程中，將待檢樣本（如血清、細胞因子等）與固相載體上的抗體或抗原發生反應。這一步涉及到特異性檢測抗體，如酶標抗體，它們能夠與抗原或抗體結合，並催化底物產生有色反應。
酶反應：加入酶標記的特異性抗體後，未結合的酶標抗體可以被洗滌掉。然後加入酶反應底物，如辣根過氧化物酶或鹼性磷酸酶的底物，這些酶會催化底物產生有色產物，如4-氨基安替比林和鄰聯甲苯胺。
根據不同的實驗設計，ELISA可以分為直接ELISA、間接ELISA、夾心ELISA和競爭ELISA等類型。這些方法各有特點，適用於不同的套用場景。例如，直接ELISA適用於檢測抗體，而間接ELISA則適用於檢測抗原。
在實際套用中，ELISA的靈敏度和特異性取決於多種因素，包括固相載體的選擇、檢測抗體的類型和質量、底物的選擇以及實驗操作的標準化。此外，ELISA的實驗步驟相對簡單，易於標準化，因此被廣泛套用於臨床診斷、疾病監測和科學研究中。