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he染色方法

HE染色方法,全稱蘇木精-伊紅染色法,是石蠟切片技術中常用的染色方法之一。這一方法在組織學、胚胎學、病理學的教學與科研中占據著基本且廣泛的套用。HE染色法的染色原理及步驟如下:

蘇木精染液呈鹼性,主要用於使細胞核內的染色質和胞質內的核酸顯現出紫藍色。蘇木精染液中含有的蘇木精是一種鹼性染料,能與帶負電的DNA雙鏈結合,使其著色。

伊紅染料呈酸性,主要用於使細胞質和細胞外基質中的成分顯現出紅色。伊紅能與嗜酸性細胞結構如細胞質、紅細胞等結合,使其著色。

具體步驟如下:

切片處理。首先對石蠟切片進行脫蠟處理,使用二甲苯和乙醇依次浸泡切片,以去除石蠟。

蘇木精染色。將處理後的切片放入蘇木精染液中染色,通常時間為2.5分鐘。染色後,用蒸餾水沖洗切片,以去除多餘的染液。

分化操作。使用分化液(如1%鹽酸乙醇)進行分化處理,以增強細胞核的對比度,分化時間約為7秒。

藍化處理。將分化後的切片放入自來水中浸泡約15分鐘,以返藍。

伊紅染色。滴加伊紅染料至切片上,染色時間約為6到7分鐘。染色後再次用蒸餾水沖洗。

脫水透明處理。將染色後的切片依次放入二甲苯和乙醇中進行脫水透明處理。此步驟的目的是去除水分,為封片做準備。

封片。使用無水乙醇和二甲苯進行最後處理,然後使用中性樹膠進行封片,以防止褪色和保持切片的穩定性。

通過這一過程,不同類型的組織結構和細胞成分(如細胞核、細胞質、不同細胞器等)會被染成不同的顏色,從而便於在顯微鏡下觀察和分析。