勵志

勵志人生知識庫

rt pcr原理

RT-PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)是一種將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。其原理如下:

首先,在逆轉錄酶的作用下,以mRNA為模板合成DNA(cDNA)。

然後,以這個cDNA為模板進行PCR反應,從而將特定的DNA片段大量擴增,便於檢測和分析。

RT-PCR具有高靈敏度和廣泛的用途,可以用於檢測細胞中基因表達水平、RNA病毒的含量,以及直接克隆特定基因的cDNA序列。此外,RT-PCR可以分為一步法和兩步法。一步法將逆轉錄和PCR擴增結合在同一個反應管中進行。兩步法則是先通過反轉錄酶生成cDNA,然後在單獨的步驟中進行PCR擴增。