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ta克隆的目的

TA克隆的主要目的是:

獲得目的片段序列:通過PCR擴增得到的目的DNA片段可以方便地克隆到T載體中。

獲得大量片段:TA克隆能夠高效地擴增DNA片段,適用於需要大量相同DNA序列的場合。

保存片段:將DNA片段克隆到載體中,可以長期保存該DNA序列,避免其丟失。

克隆和測序:TA克隆也常用於PCR產物的克隆和隨後的測序工作。

提高克隆效率:T載體帶有3'端的突出「T」尾,能夠與PCR產物3'端非模板依賴添加的「A」尾相連線,從而提高克隆效率。

靈活性:TA克隆在選擇酶切位點時具有靈活性,如果某個位點不適合使用,可以選擇其他酶進行後續操作。

TA克隆的原理是利用Taq DNA聚合酶在PCR產物3'末端非模板依賴地添加一個「A」鹼基,而T載體具有3'端的「T」突出端,兩者可以通過A-T鹼基配對在連線酶的作用下連線,實現PCR產物直接插入到質粒載體的多克隆位點中。