UPLC（Ultra Performance Liquid Chromatography）的原理基於高效液相色譜（HPLC）的理論和技術，包括使用小顆粒填料、降低系統體積、快速檢測等。
UPLC通過增加分析通量、靈敏度和色譜峰容量，提高了分離效率和檢測精度。其基本原理是利用不同物質在固定相（色譜柱）和流動相（流動相液體）之間的吸附能力和分配係數的差異，達到不同組分有不同的保留時間，從而實現分離。與HPLC相比，UPLC使用更小的顆粒填料和更低的系統體積，配合快速檢測手段，能夠在更短的時間內實現更高的分離度和靈敏度。
UPLC適用於分析高沸點、不穩定或易分解的物質，如大分子生物活性物質。