分子克隆是一種在分子生物學中常用的技術，其基本原理和步驟如下：
原理。分子克隆技術首先需要從生物體中提取或合成特定的DNA片段（目的基因），然後利用體外重組的方法將目的基因插入到克隆載體（如細菌質粒）中，形成重組克隆載體。這一過程通常涉及使用限制性核酸內切酶切割目的基因和載體，然後再用DNA連線酶將它們連線起來。接下來，通過轉化或轉導的方式將重組DNA分子引入適合的寄主細胞（如大腸桿菌），在寄主細胞中，重組DNA複製並擴增，從而實現目的基因的複製和擴增。最終，可以從寄主細胞中回收並純化出含有多個目的基因拷貝的克隆載體。
目的。分子克隆技術的目的在於獲取目的基因的多餘副本，這對於研究、診斷和治療遺傳性疾病、藥物開發等具有重要意義。
此外，在進行分子克隆時，常用PCR技術來擴增目的基因，這一技術通過循環地高溫變性、低溫退火和適溫延伸，實現目的基因的指數級擴增。分子克隆技術不僅限於擴增DNA片段，還包括RNA的克隆，例如cDNA的克隆，這涉及到從mRNA反轉錄產生cDNA的過程。