切口平移法（nick translation）是一種用於合成帶有標記的DNA探針的方法。其基本步驟如下：
使用DNase I處理雙鏈DNA：DNase I會使雙鏈DNA隨機產生單鏈斷裂，形成切口，每個切口處會產生一個5′末端和一個3′末端。
利用DNA聚合酶I的活性：
5′→3′外切酶活性：從切口的5′端逐步切除核苷酸。
5′→3′聚合酶活性：在切口的3′端-OH上依次連線dNTP，以互補的DNA單鏈為模板合成新的DNA鏈。
標記核苷酸的摻入：如果反應體系中包含標記的核苷酸（如放射性同位素標記的核苷酸），這些標記的核苷酸將替代原來的核苷酸殘基，形成帶有標記的DNA分子。
影響因素：
DNA酶I的用量：用量過多會導致切口過多，降低探針長度，且可能引起新合成的標記鏈被切開。通常標記0.5~1μg DNA樣品只需加入20~100pg的DNA酶I。
DNA模板的純度：模板中的抑制物如瓊脂糖會抑制酶活性，降低標記效率，因此應使用仔細純化後的DNA。
優點：切口平移法可以合成特定長度的DNA探針，適用於分子生物學研究和診斷套用。
缺點：
放射物質攝入率較低：長時間反應後，DNA Pol I的外切酶活性可能將已經摻入的放射性物質游離下來，降低攝入率。
對模板DNA的要求高：必須有高純度的模板DNA，且反應後必須除去未反應的放射性dNTP。
通過以上步驟和注意事項，可以有效地利用切口平移法合成帶有標記的DNA探針，用於後續的分子生物學實驗和診斷分析。