吸光光度法是一種基於物質對光的選擇性吸收特性的分析方法。其基本原理包括以下幾點：
分光光度法：通過測量物質在特定波長或波長範圍內對光的吸收度，進行定性和定量分析。
光的吸收與透射：當單色光照射到均勻介質（如固體、液體或氣體）時，部分光被吸收（I），部分透過（I），還有部分被反射（I）。在吸光光度分析中，由於使用相同的樣品池進行測量，反射光的影響較小（Io4%），可以忽略不計。透光率或透光度（T）定義為透過光與入射光的比例，T越大，表示對光的吸收越弱；T越小，表示對光的吸收越強。
朗伯-比爾定律：光的吸收程度與溶液的濃度、液層的厚度及入射光的波長有關。當入射光波長一定時，光的吸收程度與溶液濃度及液層厚度成正比。這是吸光度與濃度的定量關係，是紫外-可見分光光度分析的定量依據。
化學因素：在實際套用中，需要考慮吸光質點的相互作用、濃度影響、平衡效應等因素，這些因素可能導致朗伯-比爾定律產生負偏差。特別是在濃度較大時，可能會產生顯著的偏差。
實驗設定：吸光光度法的實驗設定通常包括分光光度計，其核心部件包括光源、單色器、吸收池和檢測器。通過這些組件，可以將混合光轉換為單色光，讓單色光通過被測的有色溶液，並投射到光電檢測器上，從而產生電流信號，顯示出吸光度和透光率。
綜上所述，吸光光度法是一種基於物質對光的選擇性吸收特性進行分析的方法，其原理涉及光的吸收與透射、朗伯-比爾定律以及實驗設定等多個方面。