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如何封片

封片是一種用於組織切片處理的過程,主要用於保護切片中的組織,並防止其乾燥和變形。以下是封片的基本步驟:

去除石蠟殘留:使用二甲苯去除石蠟切片上的石蠟殘留。建議將這一步的時間延長至平時的一倍,即二甲苯①、二甲苯②、二甲苯③可各停留30min。脫蠟後,烤片1h左右,以提高脫蠟效率和使組織與玻片貼得更緊。

染色:使用蘇木素染細胞核,然後使用伊紅染細胞質。染色後,用自來水清洗切片。

脫水封片:將切片依次放入不同濃度的酒精和無水乙醇中進行脫水,然後放入二甲苯中進行透明處理。封片時,應使用適量的二甲苯以防止幹封和產生氣泡。滴加樹膠時,要迅速敏捷,並確保樹膠濃度適中,以便成珠而不溢出玻片。樹膠用量應根據組織的大小和厚薄而定。封片時,樹膠不宜攪動,以防止氣泡的產生。如果遇到小氣泡,可以用鑷子輕壓蓋玻片來排除氣泡。

鏡檢和圖像採集:最後,將處理好的切片放在顯微鏡下檢查,並進行圖像採集和分析。

在封片過程中,還需注意以下幾點:

封片時,若離面部較近,鼻、口呼出的氣體可能含有水分,造成切片雲霧狀甚至模糊不清,需引起注意。

血清封閉時,建議使用高質量的動物血清,並在室溫下封閉1至2小時。如果室溫較低,可以考慮使用37℃孵育箱進行封閉。

以上步驟是封片的基本流程,具體操作可能因實驗的具體要求和條件而有所不同。