小鼠的保定方法對於不同的實驗需求而有所不同，主要包括徒手保定和器械保定。以下是徒手保定小鼠的常見方法：
提起小鼠尾巴，將其放在粗糙表面上，如鼠籠蓋，然後使用左手拇指和食指捏住其雙耳及頸部皮膚，將小鼠置於左手掌心，用左手無名指和小指夾住其背部皮膚和尾部，以固定小鼠。
對於年齡較大或掙扎強烈的小鼠，可用整個手指的指肚將其固定更加牢固。
以下是使用器械保定的方法：
使用小鼠保定器，讓小鼠自行鑽入固定器內，使其不能退出，這種方式適用於尾靜脈注射、採血等操作。
將小鼠痲醉後仰臥位置放置於固定板上，用橡皮筋或細線綁住小鼠四肢，再固定在固定板上的釘子上。
不同的實驗目的和要求決定使用哪種保定方法，重要的是確保小鼠在操作過程中的安全和舒適。