丁達爾效應
暗視野顯微鏡的原理主要基於丁達爾效應。
這種顯微鏡在普通光學顯微鏡的基礎上進行了改造，特別是通過使用暗視野聚光器，使得光源的中央光束被阻擋，無法直接從上至下通過標本進入物鏡。這樣，光線會改變路徑，以傾斜的角度照射在標本上，標本在光線下發生反射或散射，散射的光線隨後進入物鏡，因此整個視野顯得黑暗，只有在標本處的光線被觀察到。這種技術使得暗視野顯微鏡能夠觀察到0.004μm以上的微粒，普通顯微鏡無法觀察到的微粒，它卻能輕易看到。
此外，暗視野顯微鏡只能顯示物體的存在和運動，而不能清晰地展示物體的內部結構。