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植物提取dna的方法

植物提取DNA的方法有多種,以下是兩種常見的方法:

簡單快速的方法。首先,將植物組織(如擬南芥)與編號一一對應,並做好標記。然後,將小鋼珠放入2毫升離心管中,剪取植物葉片放入離心管。在離心管中加入200微升的TPS Buffer,使用組織破碎儀破碎組織。破碎後的液體轉移到PCR管中,進行95°C熱擊15分鐘。接著,將其放置在冰上10分鐘。加入180微升雙蒸水混勻,然後放入負20°C冰櫃保存。使用前,從冰櫃取出融化後搖勻,離心取上清作為模板。這種方法操作簡便,適合快速大量提取植物組織DNA。但它的缺點是提取的DNA純度和濃度較低,不適合對純度或濃度要求較高的實驗。

氯仿提取法。首先,稱量一定量的植物組織(新鮮或乾燥的),進行預冷處理。將植物組織研磨成粉末狀。加入適量的提取液(如氯仿或其他溶劑),劇烈渦旋使樣品充分分散。然後進行水浴處理,期間多次拿出混勻以避免沉澱。水浴後,加入氯仿進行高速混勻。室溫下離心,轉移上清液至新的離心管中。加入適量的Buffer PBD至上清液中,用移液槍吸打幾次以打散沉澱團。將gDNA柱裝在收集管中,進行離心。倒棄濾液,把柱子裝回收集管。用無水乙醇稀釋後重複離心步驟。在65°C水浴鍋中預熱BD濾液。把柱子裝回收集管,離心後,將柱子轉移到新的1.5毫升離心管中。加入Buffer AE至柱子的膜中央,室溫靜置2分鐘,再進行離心以收集DNA。最後,將DNA保存於-20°C。

這兩種方法各有優缺點,適用於不同的實驗需求和條件。