七彩神仙魚分公母的方法主要包括以下幾種：
觀察體色。公魚的顏色通常比較暗淡，多數爲灰色；母魚的顏色則較爲鮮豔，顏色種類也更多。這種方法對於野生七彩神仙魚較爲有效。
觀察生殖器。在七彩神仙魚發情期間，仔細觀察它們的生殖器。公魚的生殖器比較短小，通常呈半圓或半尖型；母魚的生殖器則是管狀的。
觀察行爲。在繁殖期間，公魚和母魚的行爲有所不同。公魚通常具有更強的攻擊性，並且會在尋找產卵場所時表現得更爲積極。
觀察體型和鰭部特徵。在同一窩魚中，體型較大的通常是公魚；體型較小的則是母魚。公魚的額頭較凸出，背鰭末端較尖；母魚的額頭較平滑，背鰭末端較圓。此外，背鰭上的黑圈（奶圈）較粗長的是母魚，較細短的是公魚。
通過以上方法，可以較爲準確地分辨七彩神仙魚的公母。