定位線有兩種不同的含義：
在航海、航空等領域，定位線（Lines of Position, 簡寫爲LOPS）是指用於確定物體位置的線。某一目標可以由線與線的交點來定義其位置，物體的運動軌跡是物體在不同時間位置點的連線。
在服裝製作，特別是JK制服裙的製作和運輸過程中，JK定位線是用來固定裙褶的線。這些線通常縫合在裙子的最下端處，目的是在快遞運輸中保持裙子的形狀，防止褶皺擴散。購買後，需要先拆掉定位線，才能穿上裙子。拆線時需要小心，以免損壞裙子本身。
在醫學領域，特別是在乳腺癌放療中，定位線是指在放療前給患者做的定位標誌線，用於指導治療方式。這些線包括第二肋間橫線和第五肋間橫線，它們的作用是確定靶區部位和靶區大小。定位線在治療過程中不應被擦洗掉，否則需要及時重畫，以確保治療的重複性和均一性。