分光光度分析（spectrophotometric analysis）是一種光學分析方法，它通過測量一束單色光通過溶液後的吸光度來進行物質的定性和定量分析。在分光光度分析中，光源發出的光經過色散作用，分散成不同波長的單色光，然後這些單色光依次通過被測物質的溶液。在通過溶液時，光會被吸收或透射，分光光度計測量溶液對每種單色光的透射比或吸光度，並可以繪製出相應的吸收光譜曲線。
不同物質具有獨特的吸收光譜，根據這些光譜可以進行物質的鑑別和濃度的測定。分光光度分析的套用範圍廣泛，包括有機和無機物質的測定、食品分析、環境監測、醫學診斷等領域。常用的分光光度計包括紫外-可見分光光度計、紅外分光光度計等，它們利用不同物質對特定波長光的吸收特性來進行定量和定性分析。
例如，紫外-可見分光光度法是在190至800納米波長範圍內測定物質的吸光度，用於鑑別和定量測定。當光穿過被測物質溶液時，物質對光的吸收程度隨光的波長不同而變化。通過測定物質在不同波長處的吸光度，並繪製其吸光度與波長的關係圖，即得被測物質的吸收光譜。物質的吸收光譜具有與其結構相關的特徵性，因此可以通過特定波長範圍內樣品的光譜與對照光譜或對照品光譜的比較，或通過確定最大吸收波長，或通過測量兩個特定波長處的吸收比值而鑑別物質。用於定量時，在最大吸收波長處測量一定濃度樣品溶液的吸光度，並與一定濃度的對照溶液的吸光度進行比較或採用吸收係數法求算出樣品溶液的濃度。