吸附柱原理是一種層析技術，它利用固體吸附劑作為固定相，配合有機溶劑或緩衝液作為流動相，形成柱體以分離混合樣品。這一過程基於吸附劑對混合樣品中不同組分吸附能力的差異。在洗脫過程中，吸附力強的組分移動距離短，較晚出柱；而吸附力弱的組分移動距離大，較早出柱。
吸附柱的工作原理涉及多種相互作用，包括疏水相互作用、離子交換和親和作用。疏水相互作用使吸附劑對疏水化合物產生親和力，離子交換涉及吸附劑中的離子與待分離化合物離子間的相互作用，而親和作用則利用親和劑選擇性地捕獲和純化帶有特定配體的化合物。
離心吸附柱是一種特殊類型的吸附柱，它利用離心力來富集、淨化和分離樣品。其內部填充的微米級固相材料具有極高的表面積，能夠強烈吸附分子，因此在生物、化學、環境、食品等多個領域的樣品製備過程中得到廣泛套用。
在吸附柱色譜中，待分離的混合物樣品被加入到裝有吸附劑的柱子中，隨後用適當的溶劑進行沖洗。由於各組分在吸附劑上的吸附能力不同，它們在柱中向下移動的速度也不同，從而實現分離。
此外，吸附色譜還涉及到分配平衡的機理，根據相似相溶原理，混合物中在固定相中溶解度大的物質會較晚出柱，保留時間長，難以被洗脫。矽膠等吸附劑與被分離物質之間產生的作用力包括物理作用（如範德華力）和化學作用（如矽羥基與待分離物質之間的氫鍵作用）。