塗平板的方法主要包括以下幾個步驟：
無菌準備。操作前1小時打開無菌室的紫外燈進行消毒滅菌；操作者需進行衣著和手的清潔消毒；所有用於微生物培養的器皿、接種用具和培養基等進行滅菌。
培養基配置。根據需要選擇合適的培養基配方，如LB肉湯或營養瓊脂培養基，並做好滅菌處理。
倒平板。將融化並冷卻至約50℃的培養基倒入無菌培養皿中，待其凝固後形成平板。
接種環準備。將接種環放在火焰上灼燒直至燒紅，然後在火焰旁冷卻。
菌液接種。打開盛有菌液的試管的棉塞，並將試管口通過火焰；將已冷卻的接種環伸入菌液中，沾取一環菌液；再次將試管口通過火焰，並塞上棉塞。
塗布平板。在培養皿中均勻塗布菌液。首先，將塗布器浸在盛有酒精的燒杯中；取少量菌液（不超過0.1mL）滴加到培養基表面；將沾有少量酒精的塗布器在火焰上引燃，待酒精燃盡後，冷卻8~10秒；用塗布器將菌液均勻地塗布在培養基表面，塗布時可轉動培養皿以確保塗布均勻。
培養。將塗好的平板放入恆溫培養箱中進行培養。如果培養時間較長，可將培養皿倒置繼續培養。
結果觀察。待菌落長出後，觀察並分析實驗結果。
這種方法主要用於微生物的分離、計數、藥物抑菌試驗等。