混合酸酐法是一種重要的多肽合成縮合方法，它涉及使用醯基胺基酸或其它羧酸與氯甲酸酯反應形成混合酸酐。這種方法的有效性取決於所選用的氯甲酸酯類型，其中氯甲酸異丁酯是目前最常用的替代品。
在多肽合成中，混合酸酐的形成通常包括將N-保護的胺基酸或肽溶於二氯甲烷、四氫呋喃、二氧六環、乙腈、乙酸乙酯或DMF等溶劑中，然後用等當量的三級鹼（如N-甲基哌啶、N-甲基嗎啉、N-乙基嗎啉等）處理。在低溫（-15℃至5℃）下劇烈攪拌，同時加入氯甲酸烷基酯以形成不對稱酸酐（活化）。隨後，加入親核性胺基酸組分以形成預期的肽衍生物。
混合酸酐法的優點包括高接肽產率和相對較高的穩定性。然而，它也存在一些缺點，如可能產生副產物氨基甲酸酯和消旋，這需要通過嚴格遵守反應條件和控制副反應來減少。例如，使用N-甲基哌啶作為鹼和二氯甲烷作為溶劑可以有效避免主要副反應。
總的來說，混合酸酐法是一種強大且廣泛使用的多肽合成技術，它通過精確控制反應條件可以獲得高純度的多肽產物。