辨別瑪瑙手鍊真偽的方法有多種，包括觀察顏色和紋理、檢查透明度、感受重量和溫度、聽聲音、觀察斷口和光澤、使用放大鏡或顯微鏡觀察細節、檢查硬度、查看內部氣泡、查看條紋理、專業鑑定機構檢測等。例如，真瑪瑙的顏色和紋理自然獨特，透明度一般較低，重量較大，溫度變化慢，輕輕敲擊會發出清脆悠揚的聲音。此外，真瑪瑙的斷口呈貝殼狀，具有玻璃光澤，而假瑪瑙的斷口可能粗糙，沒有玻璃光澤。在使用放大鏡或顯微鏡時，真瑪瑙會顯示自然形成的紋理和氣泡，而假瑪瑙可能有人工製造的痕跡。
價格也是一個判斷因素，過低的價格可能是假貨。同時，需要注意瑪瑙的質地和重量，真品通常具有堅實的質地和適度的珠子重量。如果條件允許，可以將瑪瑙手鍊送至專業鑑定機構進行檢測。