紫草油的配方有多種形式，主要包括紫草、當歸、防風、生地黃、白芷、乳香、沒藥等藥材，以及不同種類的油，如菜籽油、香油、橄欖油等。具體的配方和製作方法包括：
經典配方。紫草、當歸、地榆、黃芩、黃柏、甘草、白芷、冰片等藥材，以痲油加熱提取。
簡易配方。紫草10克、香油50克、維生素E膠丸2粒，香油加熱至160攝氏度後泡入紫草，約十小時後待油變成紫紅色，過濾進玻璃瓶，滴入維生素E油，密封遮光保存。
兒童版。軟紫草50克、當歸15克、防風15克、生地黃15克、白芷15克、乳香15克、沒藥15克、茶油或芝痲油600克。
成人版。軟紫草50克、當歸15克、防風15克、生地黃15克、白芷15克、乳香15克、沒藥15克、茶油或芝痲油600克、金銀花15克、洋甘菊15克。
紫草油的製作方法有泡製法、蒸製法、煎製法等。