《鬼泣4》中的角色主要包括：
尼祿（Nero）。本作的雙主角之一，是弗杜那城塞都市的信仰組織魔劍教團的成員，擁有強大的能力，他的右手被稱為「惡魔之右手」，可以施展出特殊能力，被稱為「惡魔持有者」。尼祿的武器是一把名為「血腥皇後」(Red Queen)的大劍，是他的主要武器，他可以利用這把劍展現出強大的戰鬥技巧。
但丁（Dante）。系列傳統的主角，這次在遊戲中退居二線，但仍然是可玩的角色之一。
維吉爾（Vergil）。但丁的兄弟，在《鬼泣4》中也有出場。
蕾蒂（Lady）。一個重要的女性角色，她的故事與但丁和尼祿交織在一起。
翠西（Trish）。另一個重要的女性角色，是維吉爾的女兒。
此外，《鬼泣4》中還包含了許多其他角色，如炎獄霸者貝里亞爾(Berial)、所羅門七十二柱魔神中的巴力(Bael)、大蟾蜍Dagon、魔樹支配者Echidna等，這些角色雖然在遊戲中的角色不如上述主角突出，但為遊戲的神話背景和戰鬥場景增添了豐富的元素。