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bca法

BCA法,全稱二喹啉甲酸法(Bicinchoninic acid assay),是一種廣泛套用於蛋白質定量分析的方法。其原理是在鹼性環境下,蛋白質與銅離子(Cu2+)發生反應,將Cu2+還原成Cu1+,然後BCA試劑與Cu1+結合,形成穩定的紫藍色複合物。這種複合物在562納米波長處有高的光吸收值,其吸光度與蛋白質濃度成正比,從而可以通過測定吸光度來計算蛋白質的濃度。

與其他蛋白質定量方法相比,如Lowry法Bradford法,BCA法具有更高的靈敏度、更簡單的操作步驟、更好的試劑穩定性,並且受干擾物質的影響較小。特別是,BCA法不受去垢劑的影響,這使得它在某些套用中優於其他方法。

BCA法的實驗操作主要包括製備BCA試劑、稀釋標準蛋白質溶液、添加樣品和BCA試劑進行反應,然後在562納米波長下測定吸光度。通過繪製標準曲線,可以計算出樣品中的蛋白質濃度。