BOD5的公式有兩種，一種用於計算生化需氧量與化學需氧量的比例，另一種用於計算五日生化需氧量。
用於計算生化需氧量與化學需氧量比例的公式為：
BOD5/COD=(1-α)×(K/V)
式中:α為生化難以降解部分CODNB與COD之比;K為BOD5與最終生化需氧量BODU之比，為常數。
用於計算五日生化需氧量的公式為：
BOD5(mg/L)=[(C1-C2)- (B1-B2)f1] / f2
式中:C1是稀釋水樣培養前的溶解氧含量(O2,mg/L); C2是稀釋水樣培養5日後剩餘的溶解氧含量;B1是稀釋空白培養前溶解氧含量; B2是空白培養後溶解氧含量; f1是空白在培養液中所占比例; f2是樣品在培養液中所占比例。