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dna loading buffer配方

DNA Loading Buffer的配方如下:

6×Loading Buffer:

30mM EDTA

36%(v/v) Glycerol

0.05%(w/v) Xylene Cyanol FF

0.05%(w/v) Bromophenol Blue

10×Loading Buffer:

30mM EDTA

50%(v/v) Glycerol

0.25%(w/v) Xylene Cyanol FF

0.25%(w/v) Bromophenol Blue

這些成分主要用於DNA電泳。6×Loading Buffer含有兩種染料(溴酚藍和二甲苯腈藍FF),而10×Loading Buffer中僅含有溴酚藍一種染料。

製備方法(以6×Loading Buffer為例):

使用注射器吸取4ml甘油,加入15ml的離心管中。

加入4ml去離子水,顛倒混勻,使甘油與水充分互溶。

向離心管中加入200μL 0.5M的EDTA。

加入500μL 10%的SDS,注意輕輕加入,避免產生大量氣泡。

繼續加入1.3ml去離子水,此時離心管中總體積為10ml,輕輕顛倒混勻,避免產生氣泡。

稱取0.025g溴酚藍,加入離心管中,輕輕混勻。

將配製好的溶液分裝至1ml的離心管中,並存放於-20°C。日常使用時,將Loading Buffer放置在室溫即可。