FDNB法，全稱為2,4-二硝基氟苯法，是一種用於測定蛋白質一級結構的化學方法。該方法的具體步驟如下：
化學反應：在室溫下，pH值為8.0至9.0的條件下，胺基酸的氨基與FDNB（2,4-二硝基氟苯）發生烴基化反應，生成DNP-蛋白（二硝基苯衍生物）。
酸水解：隨後，在105℃和6mol/L的鹽酸條件下，DNP-蛋白被酸水解，生成DNP-胺基酸和其他游離胺基酸。由於DNP-胺基酸溶於乙醚，而其他游離胺基酸不溶，因此可以通過乙醚抽提來分離出DNP-胺基酸。
鑑定：將分離出的DNP-胺基酸與已知標準的DNP-胺基酸進行紙層析比較，根據Rf值（保留因子）可以推斷出未知樣N-末端胺基酸的種類。
局限性：雖然FDNB法可以確定多肽或蛋白質N-末端的胺基酸種類，但它不能用於測定N-末端之後的胺基酸序列。
參考搜尋結果：
FDNB法的化學反應過程和其在蛋白質一級結構測定中的套用。
FDNB法也被稱為Sanger反應，它是一種特定的化學反應，用於標記多肽鏈N-末端的胺基酸。
FDNB法的步驟包括化學反應、酸水解和鑑定過程，以及其局限性。