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g418配製方法

G418的配製方法通常包括以下步驟:

準備材料。G418粉末(白色粉末,熔點138至144攝氏度,溶於水和甲醇),PBS(磷酸鹽緩衝溶液)或HEPES溶液。G418的濃度通常在100ug/ml至1mg/ml之間。

確定最佳濃度。不同的細胞系對G418的敏感性不同,因此需要確定特定細胞系對G418的最佳篩選濃度。這通常在100ug/ml至1000ug/ml範圍內確定。例如,中國倉鼠卵巢細胞的G418濃度為700至800ug/ml,而Madin-Darby犬腎細胞為500ug/ml。

配製方法。方案一,將300mg G418溶解於3ml PBS中,得到100mg/ml的濃度,配製後用0.22um濾器過濾,然後保存於-20攝氏度。方案二,將5g G418溶解於10ml 1M HEPES(pH 7.3)中,得到500mg/ml的濃度,同樣過濾後保存於-20攝氏度。

使用注意事項。由於G418對細胞培養的pH值有影響,特別是在使用高濃度G418時,推薦使用HEPES溶液作為溶劑,以維持穩定的pH值,有利於細胞的生長。

這些步驟可以根據具體的實驗需求和細胞系進行調整。