Km值是酶動力學中的一個重要參數，它表示當酶促反應速率達到最大速率（Vmax）一半時的底物濃度。Km值的計算基於Michaelis-Menten方程，該方程描述了酶促反應速率（V）與底物濃度（S）之間的關係：
V = (Vmax * S) / (Km + S)
Km值通常在10^-6到10^-2摩爾/升（mol/L）之間，單位常用mM或uM表示。Km值僅與酶的性質有關，而與酶的濃度無關。在實際套用中，Km值的計算可以通過非線性回歸方法進行，這種方法相對於傳統的雙倒數法更為準確。非線性回歸方法要求在選擇底物濃度時覆蓋米氏方程曲線的三個區域，以確保計算出的Km值準確性。