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rrna去除

去除rRNA是RNA測序過程中的一個重要步驟,因為rRNA是基因組中高度豐富和保守的成分,不為轉錄組學研究提供有用的信息。通過去除rRNA,可以更準確地表示真實的轉錄組,改進低表達或稀有轉錄本的檢測,並減少計算要求。此外,rRNA去除還有助於研究非核糖體的非編碼RNA,這些RNA在各種生物過程中可能發揮重要作用。

去除rRNA的方法主要分為兩大類:

濕實驗方法:

使用核糖體rRNA去除試劑盒或rRNA特異性探針來去除rRNA。例如,北京啟衡星生物科技有限公司的SP-ribo-Pools試劑盒通過DNA探針雜交捕獲rRNA,再用鏈霉親和素磁珠吸附去除的方法來去除rRNA。這種方法可以高效去除細胞質及線粒體中的rRNA,驗證結果顯示rRNA去除效率超過98%,並且在生物學重複之間展現極好的重複性。

生物信息軟體方法:

當已經有現成的轉錄組或宏轉錄組數據時,可以使用生物信息軟體來檢查並去除rRNA,以減少噪音並提高數據的準確性。

需要注意的是,雖然Oligo dT磁珠富集mRNA是一種常用的方法,但它僅適用於具有polyA尾巴的真核生物,不適用於原核生物提取mRNA。此外,這種方法對RNA完整度的要求較高,降解造成的polyA尾斷裂的mRNA則無法被富集。因此,在去除rRNA時,應根據研究物種的rRNA序列設計特異性的雜交探針,並選擇適合的方法進行去除。