TA克隆（TA Cloning™）是一種高效的分子生物學技術，用於將PCR產物克隆到線性化載體中。其工作原理主要基於以下幾點：
Taq聚合酶的特性：Taq聚合酶在PCR反應中具有非模板依賴性活性，能夠在PCR產物的3'末端自動添加一個單脫氧腺苷（A）。這是TA克隆技術能夠高效連線PCR插入片段到載體上的關鍵因素之一。
線性化載體的設計：在TA克隆中使用的線性化載體，其3'端含有一個3'脫氧胸苷（T）殘基。這種設計使得PCR產物（帶有3'端的A）能夠高效地與載體連線，從而提高克隆效率。
DNA連線酶的作用：在DNA連線酶的作用下，外源DNA片段與線性化載體的3'端和5'端通過磷酸二酯鍵連線，形成重組體或重組子。這一過程需要Mg2+和ATP的存在，以及適當的溫度和時間條件。
溫度和時間控制：連線反應通常在12-16℃下進行，連線時間為12-16小時（過夜），以確保連線酶的活性和氫鍵結構的穩定性，從而提高連線效率。
綜上所述，TA克隆技術利用了Taq聚合酶的非模板依賴性活性以及線性化載體的特殊設計，結合DNA連線酶的功能，實現了PCR產物的高效克隆。