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tunel法

TUNEL法(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase dUTP Nick End Labeling,末端脫氧核苷酸轉移酶介導的dUTP缺口末端標記法)是一種用於檢測細胞凋亡的技術。其原理如下:

凋亡細胞的DNA在出現不對稱斷裂時會產生一系列游離的3』-OH末端。利用末端轉移酶(TdT),可以將標記的dUTP(如螢光素標記的dUTP)結合到這些DNA的3』-OH末端上,從而可以通過螢光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測。

該方法適用於多種類型的樣品,包括石蠟切片、冷凍切片、體外培養的細胞等。TUNEL法能夠準確反映凋亡細胞的典型生物化學和形態學特徵,其靈敏度高於一般的組織化學和生物化學測定法。

儘管TUNEL法在體外原位檢測方面顯示出優越性,並被廣泛使用,但它也有一定的局限性,例如組織固定和處理過程可能會改變檢測結果,且對細胞凋亡的檢測不是特異性的,壞死細胞也可能被標記。