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一步法克隆

一步法克隆是一種基於同源重組原理的克隆構建方法,具有以下特點:

快速高效:該方法簡化了克隆過程,不需要考慮插入片段自身攜帶的酶切位點,可以快速實現定向克隆。

操作簡便:不需要純化線性化克隆載體和PCR產物,直接混合進行重組反應。

適用範圍廣:適用於任何載體,並且可以插入到任何位置。

陽性率高:由於不依賴於連線酶,無載體自連現象,因此陽性率較高。

無需酶切:PCR產物與線性化克隆載體混合後,在特定溫度下反應15分鐘即可進行轉化。

以上就是一步法克隆的基本原理和特點,希望對你有所幫助。