巴利語字母共有41個，包括8個元音和33個輔音。
元音有a，ā，i，ī，u，ū，e，o，其中a，i，u為短音，對應漢語拼音中的a，i，u。ā，ī，ū是對應的長音。e發漢語拼音ei音，髮長音。o發漢語拼音ou音，髮長音。但e和o在雙輔音之前則發短音。
輔音有k，kh，g，gh，ṅ，c，ch，j，jh，ñ，ṭ，ṭh，ḍ，ḍh，ṇ，t，th，d，dh，n，p，ph，b，bh，m，h，y，r，ḷ，ḷh，l，s，v。
此外，還有一個空點ṃ。這些字母比梵語字母多，缺少的是梵語字母中的母音ṛ，ṝ，ḷ，ḹ，ai，au，父音ś，ṣ，以及止聲ḥ。