比色皿的光程是指比色皿的內壁間距，它會影響樣品的吸光值。常用的光程長度有0.5、1、2、3、5cm。選擇合適的比色皿光程長度需要根據樣品的吸光度來決定。如果比色液的顏色較淡，建議使用光程長度較大的比色皿，如2cm或3cm；而顏色較深的比色液則應選擇光程長度較小的比色皿，例如0.5cm或1cm，以確保所測溶液的吸光度在0.1-0.7之間。
此外，石英比色皿適用於190-900nm的波長範圍，而玻璃比色皿適用於360-900nm的波長範圍。在進行紫外區的分析時，必須使用石英比色皿，並配備紫外/可見分光光度計，因為玻璃比色皿在低波長段無法使用。