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牛津杯法

牛津杯法是一種用於測定抗生素效價的方法,主要包括二劑量法和三劑量法。該方法的具體操作步驟如下:

準備培養基:

將已滅菌的瓊脂培養基加熱至完全融化,然後倒入培養皿中,每皿加入15毫升(下層)。

待下層培養基凝固後,將融化的PDA培養基冷卻至50℃左右,並加入試驗菌。將含有試驗菌的培養基5毫升倒在已凝固的下層培養基上,等待其再次凝固(上層)。

放置牛津杯:

在無菌操作下,將牛津杯(內徑6mm、外徑8mm、高10mm的圓形小管,管的兩端需光滑)直接垂直放置在培養基表面。也可以使用玻璃管或瓷管代替牛津杯。

向牛津杯中加入待檢樣品(如發酵液),注意不要讓藥物滲漏,並且在移動試驗平板至培養箱時防止牛津杯打翻。

培養與觀察:

加滿樣品後,將培養基正面向上置於37℃的培養箱中培養16至18小時。

觀察結果,通過尺子直接測量抑菌圈的大小。在培養過程中,試驗菌會開始生長,而抗生素會呈球面擴散,形成一條最低抑菌濃度帶,帶範圍內的菌不能生長,形成透明的圓圈,即「抑菌圈」。抗生素濃度越高,抑菌圈越大。

通過測量抑菌圈的大小,可以反映出待測樣品中抗生素的效價大小。